尊龙凯时的试剂盒仅限于科学研究使用,禁止用于医学诊断。该试剂盒采用双抗体一步夹心法的酶联免疫吸附试验(ELISA)。在预先包被adropin(AD)抗体的微孔中,依次加入标本、标准品以及HRP标记的检测抗体,经过温育并洗涤之后,使用TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下被转化为蓝色,随后在酸的作用下变为最终的黄色,其颜色深浅与样品中adropin(AD)的含量呈正相关。最终使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),进而计算样品浓度。
尊龙凯时试剂盒的组成如下:
试剂盒组成
- 微孔酶标板:96孔配置12孔×8条,48孔配置12孔×4条
- 标准品:03mL*6管
- 样本稀释液:6mL(48孔配置为3mL)
- 检测抗体-HRP:10mL(48孔配置为5mL)
- 20×洗涤缓冲液:25mL(48孔配置为15mL)
- 底物A:6mL(48孔配置为3mL)
- 底物B:6mL(48孔配置为3mL)
- 终止液:6mL(48孔配置为3mL)
- 封板膜:2张
- 说明书:1份
- 自封袋:1个
尊龙凯时的标准品(S0-S5)浓度为:0、25、50、100、200、400pg/mL。试剂盒的保存温度为2-8℃,有效期为6个月。
样品收集、处理及保存方法
- 血清:使用无热源和内毒素的试管,避免细胞刺激。收集血液后,3000转渣离心10分钟,迅速分离血清和红细胞。
- 血浆:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝,3000转离心30分钟后取上清。
- 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
- 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎,3000转离心10分钟取上清。
- 保存:如需延迟检测,请按一次用量分装并冷冻于-20℃,避免反复冻融。解冻时需在室温下均匀溶解。
自备物品
- 酶标仪(450nm)
- 高精度加样器及枪头(05-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL)
操作步骤及注意事项
- 试剂盒从冷藏环境中取出后须在室温下平衡15-30分钟再使用。未用完的酶标板应密封保存。
- 如洗涤液出现结晶,稀释时可温水加热帮助溶解,此过程不影响实验结果。
- 每个步骤均需使用加样器,且应校对其准确性,避免实验误差。加样时间最好控制在5分钟之内,样本数量多时,推荐使用排枪加样。
- 每次测定应同时制作标准曲线,建议做复孔。如样本中待测物质含量过高(样本OD值超过标准品第一孔的OD值),需先稀释后再测定,计算时请乘以总稀释倍数。
- 封板膜仅限一次性使用,以防交叉污染。
- 严格按照说明书进行操作,结果判定应以酶标仪的读数为准。
- 底物请避光保存。
- 所有样品、洗涤液及废弃物应按感染物处理。
- 不同批号的试剂组件不可混用。
温馨提示:尊龙凯时提供代测服务,凡购买本公司的ELISA试剂盒均可享受免费的ELISA代测服务。如需详情,请咨询销售经理或在线客服。