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WB实验指南:尊龙凯时推荐NC膜或PVDF膜选择解析

发布时间:2025-08-12   信息来源:尊龙凯时官方编辑

尊龙凯时提供多种固相载体转印膜,以满足Western Blot(WB)实验的需求。常见的转印膜主要有两种:NC膜和PVDF膜。

WB实验指南:尊龙凯时推荐NC膜或PVDF膜选择解析

NC转印膜

NC转印膜,亦称硝酸纤维素膜,其主要材料为硝酸纤维素,具有以下特性:

  • 亲水性材料
  • 质地较脆,易碎
  • 化学不耐受
  • 无需甲醇活化
  • 蛋白结合能力较低
  • 背景干净

PVDF转印膜

PVDF转印膜,即聚偏二氟乙烯膜,其主要材料为聚偏二氟乙烯,具有以下特性:

  • 疏水性材料
  • 机械强度好,耐腐蚀
  • 使用前需甲醇浸泡活化
  • 蛋白结合能力较强
  • 背景相对较高

膜的选择

选择膜的依据主要有以下几个方面:

根据孔径

  • 一般分子量为10-20kD的蛋白,建议使用0.2μm孔径的转印膜
  • 分子量大于20kD的蛋白,建议使用0.45μm孔径的转印膜

根据实验类型

  • 化学发光WB:PVDF膜使用频率高于NC膜
  • 荧光标记WB:NC膜使用频率高于PVDF膜

根据剥离和再检测

PVDF膜的蛋白结合能力较强,剥离过程中可以减少大量抗原(蛋白质)从膜中释放。同时,PVDF膜的机械强度好,不易碎裂,更适合多次清洗和再检测。

小知识:为什么PVDF膜需要甲醇活化而NC膜不需要?

PVDF作为一种高度疏水的聚合物,天然状态下不亲水,因此在水性缓冲液中时,不容易被润湿,从而影响蛋白质的结合。通过甲醇处理,可以将PVDF膜表面的氟替换为醇基团,增强其亲水性。活化后的PVDF膜表面带有正电基团,更易与带负电的蛋白质结合(如SDS处理的蛋白质)。而NC膜则具有亲水性,可以直接被缓冲液润湿,所以无需进行甲醇处理。

如有需求,请随时联系尊龙凯时,我们将为您提供优质的产品和服务。